Cosmobio水凝膠
◆ 物理特性
● 當溫度高于37℃,甚至高于60℃時,水凝膠將會發(fā)生什么變化?
隨溫度升高水凝膠將會變硬。
● 在0-60℃溫度范圍內(nèi),溶膠/凝膠/水凝膠發(fā)生相態(tài)變化的溫度范圍分別是多少?凝膠相可逆變化的溫度范圍是多少?
0℃-15℃:溶膠
15℃-20℃:溶膠和凝膠的中間體
20℃:相態(tài)變化的溫度轉(zhuǎn)折點
20℃以上:水凝膠
37℃以上:隨溫度升高,水凝膠開始變硬。
● 二氧化碳和營養(yǎng)物質(zhì)是如何供給細胞的?在水凝膠狀態(tài)下可以溶解到細胞內(nèi)嗎?
可以的,營養(yǎng)物質(zhì)和二氧化碳在水凝膠中通過多層營養(yǎng)培養(yǎng)基擴散進入細胞。
水凝膠上沒有任何空隙或小孔。
● 凝膠對二氧化碳、氮氣和氧氣是可滲透的嗎?
是的,二氧化碳、氮氣和氧氣的可以通過凝膠滲透。
● 當Mebiol Gel®處于水凝膠狀態(tài)時,細胞會被水凝膠包圍,那有足夠的空間供細胞生長嗎?
即使當Mebiol Gel®處于凝膠狀態(tài)即37℃時,其交聯(lián)點也是可變的,即會隨細胞形態(tài)的變化而變化,且沒有空隙或間隙。
● 在適當?shù)臏囟认?,Mebiol Gel®從溶膠變成凝膠需要多長時間?
3分鐘
● 溶膠-凝膠的轉(zhuǎn)換可以重復多少次?
正常情況下溶膠-凝膠相互轉(zhuǎn)換可重復多次,直到Mebiol Gel®被化學分解。另外,溶膠-凝膠相互轉(zhuǎn)換的次數(shù)取決于稀釋后的儲存溫度或氧密度。稀釋后若置于4℃儲存,Mebiol Gel®可穩(wěn)定1-2個月的時間,若分裝后置于-20℃或-80℃儲存,則可穩(wěn)定更長的時間。
● 多大分子量的營養(yǎng)物質(zhì)可通過凝膠?營養(yǎng)物質(zhì)的移動距離與分子量之間有什么相關(guān)性呢?
可通過37℃水凝膠擴散的營養(yǎng)物質(zhì)的最大分子量約為10000‐90000(確切尺寸未知)。如果營養(yǎng)物質(zhì)的分子量為數(shù)千,即1000-9000,在凝膠中擴散是沒有問題的。但如果營養(yǎng)物質(zhì)的分子量超過9000,那在擴散的時就有問題了。營養(yǎng)物質(zhì)自身的分子量越小,在水凝膠中移動的距離就越長。
● Mebiol Gel®最小凝膠質(zhì)量分數(shù)(wt%)是多少?
最小的膠濃度大概是7 wt%。Cosmobio推薦加1 g的聚合物至10 g培養(yǎng)基中,這樣制出來的膠濃度為9 wt%
◆ Mebiol Gel®和兼容的細胞類型問題
● 當在37℃下培養(yǎng)細胞時,是否可以交換培養(yǎng)基的類型?
當處于37℃時,凝膠不會溶于過量的水。因此,您可以將凝膠上的培養(yǎng)基分層,這樣就可以交換分層后的培養(yǎng)基。
● 當細胞在生長過程中接觸到水凝膠的邊緣時會受到任何阻力嗎?
不會。
● Mebiol Gel®是否適用于T細胞或MSC細胞的培養(yǎng)?
Cosmobio沒有任何關(guān)于在Mebiol Gel®中培養(yǎng)T細胞的數(shù)據(jù)。關(guān)于MSC細胞培養(yǎng),請參考以下的參考文獻:
Yuguo Lei et al., PNAS PLUS E5039E5048 doi: 10.1073/pnas.1309408110
● 請問可以使用Mebiol Gel®培養(yǎng)人肺上皮細胞嗎?是否可以提供相關(guān)的參考數(shù)據(jù)?
非常抱歉,Cosmobio沒有任何關(guān)于使用Mebiol Gel®培養(yǎng)人肺上皮細胞的數(shù)據(jù)。
● Mebiol Gel®是否已經(jīng)被報道用于培養(yǎng)腸細胞?是否有可支持的參考文獻?
非常抱歉,Cosmobio沒有任何關(guān)于使用Mebiol Gel®培養(yǎng)腸細胞的數(shù)據(jù)。
● 在溶液狀態(tài)下,提取細胞時是否會損傷細胞?
不會的。
● Mebiol Gel®是否可被用于流式細胞術(shù)?如果可以的話應該使用哪種狀態(tài)的凝膠?
可以的,當Mebiol Gel®在低溫下處于溶膠狀態(tài)是可以被用于流式細胞術(shù)。
● Mebiol Gel®是否可被用于體內(nèi)實驗?如果可以的話,它可以在小鼠體內(nèi)保留多長時間?
可以的,Mebiol Gel®可以被用于除人以外的其他物種的體內(nèi)實驗。它可以以凝膠的形式在大鼠腦內(nèi)保留至少28天。更多的信息可以參考以下的參考文獻:
T. Ozeki, K. Hashizawa, D. Kaneko, Y. Imai, H. Okada, “Treatment of rat brain tumors using sustained-release of camptothecin from poly(lactic-co-glycolic acid) microspheres in a thermoreversible hydrogel", Chem. Pharm. Bull. 58 (9), 1142-1147 (2010)
● Mebiol Gel®對細胞具有毒性嗎?如果有的話,對哪些類型的細胞可能會產(chǎn)生毒害作用?
Mebiol Gel®對所有的細胞均是無毒的。
● 有關(guān)于使用Mebiol Gel®培養(yǎng)正常或癌變的甲狀腺細胞的參考文獻嗎?
有的,請參考以下已發(fā)表文獻:
Production of hepatitis C viruses (HCV) by 3-D culture of human hepatocyte cell line? “Production of infectious hepatitis C virus particles in three-dimensional cultures of the cell line carrying the genome-length dicistronic viral RNA of genotype 1b“ Virology, 351 (2), 381-392 (2006)
◆ 其他問題
● Mebiol Gel®可以室溫儲存嗎?
可以的,粉末狀的Mebiol Gel®應置于室溫儲存。
● Mebiol Gel®的有效期是多久?
Mebiol Gel®的有效期為發(fā)貨之日起一年。
● Mebiol Gel®一次性未能用完,若將剩余的凝膠置于4℃儲存,可儲存多長時間?
大約一個月的時間,若要長期儲存,請置于-20℃或-80℃。
● Cosmobio可以提供Mebiol Gel®的試用裝嗎?
非常抱歉,Cosmobio不提供Mebiol Gel®的試用裝。
● Cosmobio如何對Mebiol Gel®進行消毒?凝膠里會有一些活體生物嗎?
Cosmobio使用EOG對凝膠進行消毒,凝膠里應該不含任何生物。
● 當使用10 mL和50 mL的Mebiol Gel®培養(yǎng)細胞時,應該使用多大規(guī)格的培養(yǎng)瓶?
應分別使用T-25和T-75的培養(yǎng)瓶。
● 當重懸Mebiol Gel®時,可以使用質(zhì)量分數(shù)為20%的Mebiol Gel®作為儲存原液,而非10%嗎?因為我希望在后續(xù)的實驗中使用其他類型的培養(yǎng)基去進一步稀釋。
可以使用20%的Mebiol Gel®代替10%的作為儲存原液。但是,請注意20%的高濃度重懸液具有很高的粘度,即使在低溫下也具有較低的流動性。
● 說明書中推薦使用10 mL的培養(yǎng)基溶解Mebiol Gel® (MBG-PMW20-1001)??梢允褂酶篌w積的培養(yǎng)基去溶解嗎?
一般情況下,Cosmobio推薦使用10 mL的培養(yǎng)基溶解10 mL的Mebiol Gel®。如果您希望溶解50 mL的Mebiol Gel®,則需要加入50 mL的培養(yǎng)基。如果低于這個濃度的Mebiol Gel®溶液,則很難形成凝膠。例如,如果您使用20 mL的培養(yǎng)基去溶解10 mL的Mebiol Gel®,則很難獲得凝膠。
● 每瓶中含有多少克的Mebiol Gel®?
10 mL規(guī)格的Mebiol Gel®溶液中含有1.0 g的Mebiol Gel®,50 mL的Mebiol Gel®溶液中含有5.0 g的Mebiol Gel®。
● 包裝瓶中的粉色藥片是什么?
是氧氣檢測試劑。與Mebiol Gel®一起,作為氧氣和水分的吸收劑,但非產(chǎn)品的一部分。
● 可以制備的Mebiol Gel®凝膠濃度最高是多少?
最高濃度大約為15 wt%。如果濃度再高,其黏性會隨著濃度的升高而增大,進而導致Mebiol Gel®即使在低溫狀態(tài)下也無法使用,例如在20 wt%濃度下就已經(jīng)無法使用
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